维生素C标准曲线的绘制:分别吸取配置好的维生素C标准溶液(1000μg/mL)0.5mL、1mL、效准2mL、确测5mL、定油的方10mL,菜中并用1%的维生盐酸定容至100mL。获得浓度为5.0μg/mL、含量10.0μg/mL、种高20.0μg/mL、效准50.0μg/mL、确测100.0μg/mL的定油的方维生素C标准工作液。由图1可以看出,菜中在5~100μg/mL浓度范围内,维生维生素C呈现出良好的含量线性关系。回归方程为y=10241x-1042.1,种高R2=0.9998,相关系数r为0.9999。
5个容量瓶中,分别加入等量的且已知维生C含量的油菜幼苗样品溶液,然后再分别加入不同量的维生素C标准溶液,充分混匀后,测定样品中维生素C的含量,计算出该方法的回收率(表1)。从测得结果可知,测定油菜中维生素C含量方法的回收率为97.97%~101.40%。
利用液氮保存样品并研磨后进行萃取处理,在相同的实验条件下对同一个油菜幼苗样品重复测定6次。图2为油菜中维生素C含量的色谱图,从图中可知维生素C的样品保留时间在2.7min。由表2中的维生素C含量测得结果可知,油菜维生素C含量的平均值为101.54mg/100g,精密度实验的RSD仅为1.84%,说明此方法测试结果的稳定性和可重复性好。
对从田间取回的新鲜样品以及在4℃、-20℃和液氮中贮藏3d的小白菜、生菜、菠菜、油菜(8E006)幼苗进行维生素C含量的检测。经测定,小白菜、生菜、菠菜、油菜幼苗新鲜样品中的维生素C含量分别为48.65mg/100g、13.75mg/100g、80.46mg/100g、102.67mg/100g。图3显示,小白菜、生菜、菠菜、油菜幼苗在4℃、-20℃条件下贮藏3d后,所测维生素C含量显著低于其新鲜样品所测维生素C的含量。与新鲜样品相比,小白菜、生菜、菠菜、油菜幼苗在4℃贮藏3d后所测的维生素C的含量分别下降了43%、48%、44%、51%;在-20℃贮藏3d后分别下降了23%、24%、36%、26%。然而图3显示,在液氮贮藏3d的样品所测得维生素C的含量反而显著高于其新鲜样品的含量,分别增加了20%、16%、9%、15%。极可能新鲜样品在田间取样及运输过程中,维生素C发生降解,而低温可有效阻止维生素C的降解;样品的贮藏温度越低,维生素C降解的速度越慢。因此,用液氮贮藏田间取回的样品更有利于样品中维生素C的保存和准确测定。
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